Capítulo 7, Manual de Biossegurança: Descontaminação

A descontaminação de culturas e objetos contaminados por agentes biológicos é rotineiramente realizada em laboratórios microbiológicos. A descontaminação é um componente vital da prática de segurança microbiológica e serve para proteger o pessoal do laboratório (bem como outros) contra infecções, bem como a liberação de organismos infecciosos para o ambiente externo. A descontaminação de meios, superfícies de trabalho e equipamentos também é necessária para evitar a contaminação de organismos cultivados.

A descontaminação de superfícies de trabalho, equipamentos, cabines de segurança biológica e outros objetos inanimados usando agentes antimicrobianos é chamada de desinfecção. Vários agentes químicos são usados ​​como desinfetantes. Os trabalhadores de laboratório devem lembrar que existem perigos associados a todos esses desinfetantes químicos. A inalação e o contato com a pele devem ser minimizados e o contato com os olhos evitado. Luvas e óculos de segurança apropriados devem sempre ser usados ​​ao manusear esses produtos químicos.

A suscetibilidade dos micróbios a desinfetantes químicos varia de acordo com sua estrutura física e estado físico (por exemplo, estado de esporo mais resistente). Por exemplo, a parede celular externa cerosa das micobactérias fornece maior resistência. Os vírus que não possuem lipídios no capsídeo externo os tornam mais hidrofílicos e geralmente mais resistentes a desinfetantes químicos do que os vírus lipofílicos. A ordem de resistência dos micróbios aos desinfetantes químicos, do mais resistente ao menos resistente, é apresentada na próxima página.

A seguir está uma lista de resistências de micróbios a desinfetantes químicos, ordenadas do mais resistente ao menos resistente:

* Adaptado de Biological Safety: Principles and Practices, Fleming, DO and Hunt, DL, eds, 4th Edition (2006), ASM Press, Washington, DC

Informações pertinentes para alguns dos desinfetantes químicos comuns são resumidas em formato de tabela no final deste capítulo.

A autoclavagem usa vapor saturado sob pressão (aproximadamente 15 psi) para atingir uma temperatura na autoclave de pelo menos 121 °C (250 °F). A autoclavagem pode ser usada para destruir bactérias vegetativas, esporos bacterianos e vírus. Ao descontaminar resíduos com risco biológico, recomenda-se que a temperatura dos resíduos atinja um mínimo de 115 °C por um período mínimo de 20 minutos. O tempo total de processamento necessário para atender a essas condições depende de vários fatores de carga (veja abaixo); no entanto, um ciclo mínimo de autoclave de uma hora deve ser usado ao descontaminar resíduos com risco biológico.

Existem três fatores que, combinados, determinam a eficácia da autoclavagem:

Temperatura - a autoclave usa vapor sob uma pressão de aproximadamente 15 psi para atingir uma temperatura de câmara de pelo menos 121 °C. Embora a câmara da autoclave possa atingir 121 °C, isso não significa necessariamente que o interior da carga atingirá essa temperatura.

Tempo - um tempo mínimo de ciclo de autoclave de vinte minutos a uma temperatura de câmara de 121 °C (o tempo não começa assim que o ciclo de autoclave é iniciado) é comumente recomendado para esterilização de itens limpos. No entanto, o tempo total de processamento necessário para obter a descontaminação depende de vários fatores de carga, incluindo o recipiente da carga (propriedades de transferência de calor), a quantidade de água contida na carga e o peso da carga. Para cargas maiores, é necessário um tempo de ciclo mais longo para garantir uma descontaminação eficaz. Para o tratamento de resíduos com risco biológico, é necessário um tempo mínimo de autoclave de 60 minutos. Isenções ao tempo mínimo de autoclave de 60 minutos serão consideradas caso a caso e devem ser aprovadas pelo Oficial de Biossegurança ou pelo Comitê Institucional de Biossegurança. Os pedidos de isenção devem ser enviados ao Oficial de Biossegurança com um SOP por escrito que descreva os resíduos biologicamente perigosos, as condições da autoclave, o tempo de autoclave e o procedimento de teste de eficácia da autoclave e a frequência do teste. Em nenhum caso será aprovado um tempo de autoclave inferior a 30 minutos.

Contato - a saturação do vapor é essencial para a máxima transferência de calor. O vapor deve entrar em contato com todas as áreas da carga. Sacos de autoclave e outros recipientes devem ser deixados parcialmente abertos (ou permitir a entrada de vapor) para garantir o contato adequado. Estudos demonstraram que a adição de água no interior da bolsa melhora o perfil de tempo-temperatura do ciclo da autoclave, aumentando a eficiência de esterilização da autoclave.